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技術文章

核酸蛋白分析儀數據異常的解決策略

實驗中常遇到核酸蛋白分析系統數據異常的問題,通過系統排查可快速找到解決方案。

比值異常
蛋白質污染:若 A260/A280 比值低于 1.8(DNA)或 1.5(RNA),可能存在蛋白質污染。解決方法:用酚 - 氯仿抽提法重新純化樣本,或使用柱純化試劑盒。
鹽離子干擾:若 A230/A260 比值升高(>0.5),可能存在鹽離子污染。解決方法:增加乙醇洗滌步驟,或使用透析法去除鹽離子。
核酸污染(蛋白質樣本):若 A280/A260 比值升高,可能存在核酸污染。解決方法:加入 RNA 酶或 DNA 酶消化核酸,或通過離心去除沉淀。
濃度異常
樣本降解:若 A260/A280 比值正常但濃度顯著低于預期,可能樣本發生降解。解決方法:重新提取樣本,避免反復凍融。
儀器誤差:若多次測量結果差異較大,可能儀器需要校準。解決方法:使用標準品(如 λDNA)驗證儀器準確性,必要時聯系廠家校準。
操作失誤:若空白對照未正確設置,可能導致濃度計算錯誤。解決方法:重新進行空白校準,確保空白液與樣本稀釋液一致。
光譜曲線異常
雜峰干擾:若在 270nm 附近出現雜峰,可能存在酚類殘留。解決方法:增加洗滌步驟,或使用硅膠膜吸附法純化樣本。
基線漂移:若光譜曲線整體偏移,可能儀器預熱時間不足。解決方法:延長預熱時間至 30 分鐘,確保光路穩定。

通過準確判斷核酸蛋白分析儀數據準確性,并針對性的采用解決策略,可有效排除數據異常問題,科研人員能充分發揮儀器性能,保障實驗順利進行。
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